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C4、C8、C18預裝反相色譜柱必須在至少含有5%有機溶劑的移動相中工作。在100%水溶液中，預裝色譜柱內的填料很可能會發生脫水，也就意味着該移動相將在表面張力的作用下被填料微球的內孔系統所排斥。在這種情況下，待分析樣品或多或少是路經死體積被洗脫出來。並且，一旦移動相在色譜柱內靜止時問題就會暴露出來。如果填料脫水現象已經發生，在色譜柱上連續泵入40分鍾左右，有機溶劑含量至少達到50%的移動相，就可以使色譜柱狀態恢複到原來水平。
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